地高辛标记是目前公认的最灵敏的DNA和RNA探针非放射性标记技术,适用于Southern杂交、Northern杂交、原位杂交、染色体杂交、斑点杂交和文库筛选等几乎所有的分子杂交场景,应用非常广泛。目前,使用较广的地高辛标记试剂是Roche公司的随机引物标记试剂盒(Dig DNA Labeling and Detection Kit)和地高辛RNA标记试剂盒(Dig RNA Labeling Kit)。这二种试剂盒都具有非常优异的探针标记性能,但缺点也非常明显,那就是价格昂贵,以至于很多研究者都望而却步。并且,在有些时候,国内货源紧张,到货时间较长,对研究进展影响很大。百代生物海归团队经长期研发,研发成功了可高效进行地高辛标记的试剂盒----BIOG地高辛标记试剂盒。
试剂盒采用热启动PCR技术,对DNA和cDNA模板进行地高辛标记,与随机引物法和RNA探针相比,具有非常显著的性能优势。其一,PCR是目前公认的效率高的DNA体外扩增技术之一,BIOG地高辛标记试剂盒采用PCR技术进行探针制备,只需非常微量的模板,就能制备出大量的高活性的地高辛标记探针。取5ng Hela细胞基因组DNA为模板,使用BIOG地高辛标记试剂盒标记GAPDH,就可以制备出高达1ug较纯的均质化的GAPDH探针。其二,BIOG地高辛标记试剂盒使用了我公司基因工程优化的超级热启动Taq酶,该酶经严格的化学封闭,在室温下完全没有活性,可最大程度地减少因引物模板错配以及引物二聚体形成等导致的非特异性标记,探针标记特异性高。其三,试剂盒配置的超级热启动Taq酶在合成DNA链的过程中,较普通Taq酶能够更加高效地掺入地高辛标记的核苷酸,而试剂盒配置的Dig Labelling经反复实验优化,Dig-dUTP与未标记核苷酸也处于最佳搭配比例,Dig-dUTP能够大程度地掺入PCR产物,这使得BIOG地高辛标记试剂盒的地高辛标记效率显著优于部分同类产品。以BIOG地高辛标记试剂盒和同类试剂盒X分别标记5ng Hela细胞DNA,5倍稀释PCR产物,点样于尼龙膜,再以NBT/BCIP进行检测,X公司PCR标记试剂盒制备的探针,0.5pg点样斑点可被有效检测,而BIOG地高辛标记试剂盒制备的探针,点样量低至0.1pg,仍可被有效地检测出来,这说明,同样量的标记探针,BIOG地高辛标记试剂盒制备的探针中地高辛掺入量显著优于X公司。以上可见,BIOG地高辛标记试剂盒具有非常优异的探针标记和制备性能。然而,该试剂盒的定价却并不高,10T的试剂盒定价只有1600多元,远远低于国外同类产品。由于其出色的性价比,BIOG地高辛标记试剂盒广受研究者的欢迎,目前已经成为200多所大学和科研单位进行分子杂交的有力工具。